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第127章结局二（第3页）

1.材料的制备

健壮枝梢去除叶片分成1-50px自来水冲洗消毒75%的酒精30秒0.1%升汞或20倍次氯酸钠消毒8-10min无菌水修剪剥离茎尖，通常切割下顶端0.2-0.5mm叶原基的茎尖（无菌水）接种。

2.培养基

多为MS培养基及其改良配方，还有White、B5等。

3.培养条件

（1）温度：26℃-28℃

（2）光照：光培养的效果通常比暗培养好。

（3）湿度：与其他器官培养相似。

分生组织之所以能避开病毒侵染，可能有4方面原因：

1、在植物体中，病毒的移动主要靠两条途径，一是通过维管系统，而分生组织中尚未形成维管系统；二是通过胞间连丝，但这条途径病毒移动速度非常缓慢，难以追赶上活跃生长的茎尖和根尖。

2、在旺盛分裂的分生组织中，代谢活动很高，使病毒无法进行复制。

3、在茎尖中存在高水平内源激素，可以抑制病毒的增殖。

4、在植物体内存在有一种“病毒钝化系统”，它在分生组织中的活性应最高，因而使分生组织不受侵染。

以上是四种可能原因，无论哪种说法正确，事实是分生组织一般不带病毒。因此，利用这一原理，进行茎尖培养，培育无病毒苗。

（二）茎尖培养脱毒

1.茎尖培养脱毒的原理

（1）病毒在植物体内的分布

病毒浓度不同，离尖端越远病毒浓度越高。茎尖或根尖离体培养便可获得无病毒再生植株。

必须指出的是，所谓无病毒，只是相对的，不是绝对的。

（2）茎尖大小与脱毒

茎尖外植体的大小与脱毒效果成反比。茎尖分生组织不能合成自身需要，生长素，细胞分裂素，因而带叶原基的茎尖生长快，成苗率高。因此茎尖越大培养成活率越高。因此对不同植物脱毒适宜的茎尖大小不同

茎尖培养脱毒的方法

（1）取样与消毒

可直接选定的植株上取顶芽与侧芽进行消毒接种。

消毒方法是：剪取顶芽梢段3、5厘米，剥去大叶片，用自来水冲洗干净，在75%酒精中浸泡30秒左右，用1%-3次氯酸钠或5%-7%的漂白粉溶液消毒10-20分，最后用无菌水冲洗材料4-5次。

（2）接种

材料置10～40倍的双筒解剖镜下，解剖刀切取0.1～0.3mm带有1～2个叶原基的茎尖，接种到培养基上。

（3）培养

接种后材料置25+2℃，光照度1500-5000LX，每日光照10-16h条件下培养。但一般光照培养比暗培养效果好。其间应更换新鲜培养基。提高培养基中6-BA的浓度可形成大量从生芽。

3.培养基与培养方式：

（1）培养基：常用MS，White等培养基。

（2）培养方式：茎尖培养一般采用半固体培养基

全剧终！

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